Comparação da evidenciação dos miofibroblastos marcados por imuno-histoquímica em tecido de granulação quando fixado por formol ou por álcool a 70% / Comparison of myofibroblast visualization by immunohistochemical staining in granulation tissue fixed in formaldehyde or 70% alcohol

Introdução: Para o adequado estudo anatomopatológico dos tecidos obtidos dos pacientes é crucial a boa técnica para a melhor evidenciação das células pesquisadas. É imprescindível que não só a técnica ideal de coloração/marcação seja utilizada, mas também a correta técnica de fixação da peça cirúrgica. Em trabalho prévio pesquisando miofibroblastos e contração na pele restaurada de áreas doadoras de enxertos de pele de espessura parcial, verificamos baixa densidade de miofibroblastos, ao contrário dos estudos em tecido de granulação. Investigando as causas disso, e baseando-se em artigo específico sobre a eficácia da evidenciação imuno-histoquímica com diferentes métodos de fixação tecidual, comparamos a eficácia dos diferentes fixadores, formol a 10% e álcool a 70% para a evidenciação de miofibroblastos em tecido de granulação de úlceras crônicas de 21 pacientes. Método: Estudamos 42 amostras por meio de técnica imuno-histoquímica, utilizando-se o anticorpo anti-Smooth Muscle Actin, nas quais contamos os miofibrobastos em 10 campos com aumento de 400 X. Resultados: Demonstraram-se melhores resultados qualitativo e quantitativo no material fixado em álcool, quando comparado ao fixado em formol, com densidades médias de miofibroblastos de 86,5 e 48 células/mm2, respectivamente, o que nos leva a recomendar o álcool como fixador de tecidos para estas análises imuno-histoquímicas.

Background: The use of a good visualization technique is crucial for an adequate pathological anatomy study of tissues obtained from patients. Optimal staining and fixation techniques of the surgical piece are essential. In a previous study investigating myofibroblasts and contraction in split skingraft donor sites, a low density of myofibroblasts was observed, as opposed to studies in granulation studies. To investigate the causes for this finding and based on a specific manuscript on the efficacy of immunohistochemical visualization using different tissue fixation methods, we compared the efficacy of fixation in 10% formaldehyde and 70% alcohol for the visualization of myofibroblasts in granulation tissues of chronic ulcers in 21 patients. Method: Forty-two samples were studied by immunohistochemistry, using the anti-Smooth Muscle Actin antibody, and myofibroblasts were counted in 10 fields with a magnification of 400X. Results: Better qualitative and quantitative results were observed in alcohol-fixed materials, when compared to those fixed in formaldehyde, with mean myofibroblasts densities of 86.5 and 48 cells/mm2, respectively, which encourages us to recommend the use of alcohol for tissue fixation in immunohistochemical studies.

Utilizaçäo de artéria bovina tratada pelo glutaraldeido em aorta abdominal de cäo: análise morfológica de nove enxertos após 196 dias de implantaçäo / Use of bovine artery treated by glutaraldehyde in abdominal aorta of the dog: morphological analysis of 9 grafts after 196 days of implantation

Nove cäes mestiços adultos foram submetidos a interposiçäo de segmento de artérias bovina em aorta abdominal infrarrenal. Os segmentos arteriais foram preparados a partir da artéria torácica interna, as quais foram colocadas em soluçäo salina gelada, até transporte para o laboratório, onde era feita a retirada do tecido conjuntivo e adiposo perivascular e ligadas as colaterais. A seguir, usando-se o aparelho apresentado por KAPLAN e col., as artérias foram fixadas em sol. de glutaraldeído a 0,65//, objetivando-se a avaliaçäo da eficácia deste método, através de análise morfológica dos enxertos com mais de seis meses de implantaçäo. Após este período os animais foram sacrificados para retirada do enxerto. Foi encontrada como achado mais marcante, rigidez de seis enxertos, a qual correspondia à calcificaçäo nas preparaçöes histológicas. Dois animais evoluíram com trombose dos enxertos, a qual ocorreu gradativamente, com formaçäo de rica circulaçäo colateral. Nenhum caso de aneurisma, infecçäo ou rejeiçäo do enxerto foi registrado. Hiperplasia de íntima em dois casos, discreta reaçäo inflamatória linfo-plasmacitária perienxerto e tendência a hialinizaçäo em todos foram os achados dos microscópicos mais marcantes. Conclui-se que a metodologia empregada foi eficaz em evitar reaçäo de rejeiçäo, degeneraçäo, dilataçäo e infecçäo em todos os casos, com ocorrência de clacificaçäo em dois terços dos casos, mas proporcionando uma boa aceitaçäo do enxerto pelo hospedeiro